捕获测序磁珠

用于靶向捕获测序的链霉亲和素磁珠

高通量测序（或新一代测序，Next Generation Sequencing, NGS）是对传统Sanger测序的革命性变革，解决了一代测序一次只能测定一条序列的限制，一次运行即可同时得到几十万到几百万条核酸序列信息，但这些测序数据分析的复杂程度大大增加了科研人员的工作量，且随着测序深度的增加，测序成本也日益增加。基于高通量测序技术的靶向捕获测序可以针对目标基因组区域进行分离、富集和测序，检测灵敏度高且数据分析难度低，在精准医疗的时代，发挥着越来越大的作用。

文库构建是靶向捕获测序获得有效结果的基础和关键，目标区域捕获又是影响文库构建质量的关键。液相杂交捕获是靶向捕获测序中常用的目标区域捕获方法之一，在该技术中标记生物素的探针与目标区域杂交后，通过与磁珠表面包被的链霉亲和素结合实现目标区域的捕获，随后经变性将探针与目标区域分开，通过磁分离去除结合在磁珠表面的空探针后，即可完成目标区域的捕获。链霉亲和素磁珠作为液相杂交捕获的核心原料之一，其品质的优劣直接影响文库构建的质量，进而影响测序结果的准确性。

图1. Agilent SureSelect液相杂交捕获流程

目前进口磁珠如Dynabeads、JSR及Merk的链霉亲和素磁珠仍然在靶向捕获测序中占有较大份额，但随着测序成本降低的需求及在国家大力发展自主核心产品的号召下，国内也出现了一批优秀的磁珠微球生产厂家，有望实现进口产品替代。

MagBeads^®微米磁珠系列是贝斯特bst2222生物专家团队经多年研发精心打造、具有高水平质量的明星产品。微米磁珠采用经典的核壳结构设计制造，内核为聚合物微球，外层为磁性物质，最外层采用特殊聚合物修饰，具有尺寸分布均一、表面负载量高、磁响应时间短、分散稳定性好等特点，可以快速、高效地从样本中分离出待测物，极大地提高检测效率。

图2. MagBeads^®微米磁珠系列示意图

MagBeads^®链霉亲和素磁珠通过共价偶联技术将链霉亲和素固定在磁珠表面，可用生物素化核酸、蛋白质等生物分子的偶联。目前此款磁珠已应用在化学发光及靶向捕获测序中，并获得了一批稳定的客户，期待有更多的客户试用并采用贝斯特bst2222生物的链霉亲和素磁珠。

(a)

(b)

图3.（a）（b）为不同标尺下MagBeads^®链霉亲和素磁珠扫描电镜图

MagBeads^®链霉亲和素磁珠性能：

Ø 磁珠粒径为1 μm，且尺寸均一、表面基团分布均匀，可保证杂交捕获过程的一致性，使文库更加标准化；

Ø 磁珠表面修饰亲水性多聚物分子，并共价偶联了多层链霉亲和素，使磁珠表面被链霉亲和素致密包裹，防止磁颗粒泄露并极大程度降低了非特异性吸附，保证杂交捕获的特异性；

Ø 磁珠表面具有颗粒状粗糙度，比表面积高，同时极高的链霉亲和素载量，可保证对标记生物素的探针具有较高的吸附容量；

Ø 磁珠具有良好的悬浮性，在pH3.0-9.0的环境中可保持稳定，满足杂交捕获过程中自动化高通量的要求；

Ø 磁珠具有超顺磁性，磁含量高且磁响应速度快，可保证捕获结束后，快速彻底去除携带空探针的链霉亲和素磁珠；

Ø 磁珠产量稳定、批间可重复性高，可保证杂交捕获文库构建的稳定性。

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